Caracterização das proteínas do glúten de trigo brasileiro de diferentes qualidades tecnológicas por Espectrometria de Massas

Rodrigues, Sónia Kristy Pinto Melo

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dc.contributor.advisor	Ferreira, Mariana Simões Larraz
dc.contributor.author	Rodrigues, Sónia Kristy Pinto Melo
dc.date.accessioned	2018-03-09T16:46:39Z
dc.date.available	2018-03-09T16:46:39Z
dc.date.issued	2016-12-22
dc.identifier.citation	RODRIGUES, Sónia Kristy Pinto Melo. Caracterização das proteínas do glúten de trigo brasileiro de diferentes qualidades tecnológicas por Espectrometria de Massas. 2016. 53 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Biomedicina) - Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro, Instituto Biomédico., Rio de Janeiro, 2016.	pt_BR
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/unirio/11307
dc.description.sponsorship	Unirio	pt_BR
dc.language.iso	Portuguese	pt_BR
dc.rights	openAccess	pt_BR
dc.title	Caracterização das proteínas do glúten de trigo brasileiro de diferentes qualidades tecnológicas por Espectrometria de Massas	pt_BR
dc.title.alternative	Characterization of Brazilian wheat proteins of different technological qualities by Mass Spectrometry	pt_BR
dc.type	bachelorThesis	pt_BR
dc.contributor.referee	Ferreira, Mariana Simões Larraz
dc.contributor.referee	Gonçalves, Rafael Braga
dc.contributor.referee	Moreira, Ricardo Felipe Alves
dc.degree.department	CCBS-Instituto Biomédico	pt_BR
dc.degree.grantor	Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro - UNIRIO	pt_BR
dc.degree.level	Graduação	pt_BR
dc.degree.local	Rio de Janeiro, RJ	pt_BR
dc.degree.program	Bacharelado em Biomedicina-CCBS	pt_BR
dc.subject.cnpq	Outros	pt_BR
dc.subject.cnpq	Biomedicina	pt_BR
dc.subject.en	LC-MS	pt_BR
dc.subject.en	gliadin	pt_BR
dc.subject.en	glutenin	pt_BR
dc.subject.en	prolamins	pt_BR
dc.subject.en	Triticum aestivum	pt_BR
dc.description.abstracten	Wheat grain is considered the most suitable raw material for the manufacture of bread and pasta due to its texture and quality of the storage proteins. Wheat is the second most cultivated cereal in the world, however, Brazilian production is lower than demand and presents low technological quality. Technological quality drives the industrial use of wheat and is closely related to the gluten quality, which depends on the storage proteins and the glutenin polymer profile. Proteomic approaches prove to be an important tool for the characterization of wheat proteins. In order to obtain a better understanding of the factors determining the quality of Brazilian wheat, this work aimed to characterize the gluten proteins of Brazilian wheat flours of different technological qualities, using Ultra Performance Liquid Chromatography coupled with High Definition Mass Spectrometry (UPLC-HDMS). In this work, 9 Brazilian wheat flours were classified as Strong, Medium and Low quality, being 3 varieties of each. The moisture and total protein content was determined. After extracting and quantifying the proteins, a pool was performed according to each classification. Protein digestion, reduction and alkylation were done. The acquisitions were performed in NanoUPLC-HDMS Synapt G2-S system (Waters) and the data were analyzed in PLGS software (Waters). Globally 5,493 peptides were identified in all replicates and 610 peptides per replicate. A total of 150 proteins were identified, showing on average 6 peptides identified per protein. The identified proteins showed similar dynamic range of more than 4 orders of magnitude for all samples, indicating a similar distribution of protein expression. From the 150 proteins, 82 were common to all 3 samples. Most of the identified proteins have not yet been characterized in function, emphasizing the need for more studies on the characterization of these proteins. Regarding the unique proteins to each sample, gliadins and low molecular weight glutenins were the most important. These proteins are also determining factors of the wheat technological quality. The application of chromatographic techniques coupled with mass spectrometry proved to be efficient in the identification of wheat proteins and provide new perspectives for evaluating the technological quality of Brazilian wheat flour. However, these results still require a detailed quantification step.	pt_BR
dc.description.sponsordocumentnumber	n/a	pt_BR
dc.description.abstractpt	O grão de trigo é considerado a matéria-prima mais adequada para a fabricação de pães e massas devido a sua textura e qualidade das proteínas de reserva. O trigo é o 2º cereal mais cultivado no mundo, no entanto, a produção brasileira é inferior à demanda e apresenta baixa qualidade tecnológica. A qualidade norteia a utilização industrial do trigo e está intimamente relacionada com a qualidade do glúten, que depende das proteínas de reserva e do perfil polimérico das gluteninas. Abordagens proteômicas revelam-se como importantes ferramentas para a caracterização das proteínas do trigo. No sentido de obter melhor entendimento sobre os fatores determinantes da qualidade do trigo brasileiro, este trabalho teve como objetivo caracterizar as proteínas do glúten de farinhas de trigo brasileiro de diferentes qualidades, por meio de cromatografia líquida de ultraperformance acoplada à espectrometria de massas de alta definição (UPLC-HDMS). Neste trabalho, foram utilizadas 9 farinhas de trigo brasileiro classificadas como Forte, Média e Fraca, sendo 3 variedades de cada. Determinou-se o teor de umidade e de proteínas totais. Após extração e quantificação das proteínas, foi realizado um pool de acordo com cada classificação. Foi feita a digestão, redução e alquilação das proteínas. As aquisições foram realizadas em sistema NanoUPLC-HDMS Synapt G2-S (Waters) e os dados foram analisados no software PLGS (Waters). Foram identificados 5.493 peptídeos em todas replicatas e 610 peptídeos por replicata. Foram identificadas 150 proteínas, que apresentaram em média 6 peptídeos identificados por proteína. As proteínas identificadas apresentaram taxas dinâmicas similares com mais de 4 ordens de magnitude para todas as amostras, indicando uma distribuição similar de expressão proteica. Das 150 proteínas, 82 foram comuns às 3 amostras. A maioria das proteínas identificadas ainda não foi caracterizada quanto à função, ressaltando-se a necessidade de mais estudos quanto à caracterização dessas proteínas. Com relação às proteínas exclusivas de cada amostra, as gliadinas e gluteninas de baixo peso molecular foram as principais. Tais proteínas são também fatores determinantes na qualidade tecnológica do trigo. A aplicação de técnicas cromatográficas acopladas à espectrometria de massas mostrou-se eficiente na identificação das proteínas do trigo e fornecem novas perspectivas de avaliação da qualidade tecnológica de farinha de trigo brasileiro. No entanto, os resultados necessitam ainda de uma etapa de quantificação detalhada.	pt_BR
dc.subject.pt	LC-MS	pt_BR
dc.subject.pt	gliadina	pt_BR
dc.subject.pt	glutenina	pt_BR
dc.subject.pt	prolaminas	pt_BR
dc.subject.pt	Triticum aestivum	pt_BR