Respostas de defesa em Nicotiana tabacum cv. SR1 induzidas pela peptideogalactomanana presente na parede celular de Fusarium oxysporum

Monteiro, Natália Cipriano

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BIOM - Trabalhos de Conclusão de Curso - Graduação
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dc.contributor.advisor	Haido, Rosa Maria Tavares
dc.contributor.author	Monteiro, Natália Cipriano
dc.date.accessioned	2018-03-14T14:46:12Z
dc.date.available	2018-03-14T14:46:12Z
dc.date.issued	2017-07-31
dc.identifier.citation	MONTEIRO, Natália Cipriano. Respostas de defesa em Nicotiana tabacum cv. SR1 induzidas pela peptideogalactomanana presente na parede celular de Fusarium oxysporum. 2017. 87 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Biomedicina) - Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro, Instituto Biomédico., Rio de Janeiro, 2017.	pt_BR
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/unirio/11376
dc.description.sponsorship	UNIRIO e CNPQ	pt_BR
dc.language.iso	Portuguese	pt_BR
dc.rights	openAccess	pt_BR
dc.title	Respostas de defesa em Nicotiana tabacum cv. SR1 induzidas pela peptideogalactomanana presente na parede celular de Fusarium oxysporum	pt_BR
dc.title.alternative	Defense responses in Nicotiana tabacum cv. SR1 induced by peptideogalactomannan in the fungal cell wall of Fusarium oxysporum	pt_BR
dc.type	bachelorThesis	pt_BR
dc.contributor.advisor-co	Silva, Maite Vaslin de Freitas
dc.contributor.referee	Haido, Rosa Maria Tavares
dc.contributor.referee	Dias, Rubens Clayton da Silva
dc.contributor.referee	Silva, Anna Karoline Fausto da
dc.contributor.referee	Montebianco, Caroline de Barros
dc.degree.department	CCBS-Instituto Biomédico	pt_BR
dc.degree.grantor	Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro - UNIRIO	pt_BR
dc.degree.level	Graduação	pt_BR
dc.degree.local	Rio de Janeiro, RJ	pt_BR
dc.degree.program	Bacharelado em Biomedicina-CCBS	pt_BR
dc.subject.cnpq	Outros	pt_BR
dc.subject.cnpq	Biomedicina	pt_BR
dc.subject.en	Fusarium oxysporum	pt_BR
dc.subject.en	PGM	pt_BR
dc.subject.en	Hypersensitivity Response	pt_BR
dc.subject.en	Systemic Acquired Resistance	pt_BR
dc.subject.en	PR1 and PAL	pt_BR
dc.description.abstracten	Fusarium oxysporum is a phytopathogenic fungus highly studied due to its ability to infect harvests of great economic importance. It is also described as an emerging pathogen causing opportunistic diseases in immunocompromised human hosts. Its cell wall consists mainly of polysaccharides (80-90%) and glycoproteins, many of which have a broad immunological action, and are capable of inducing immune / defense responses in the infected host. The microorganism used was the 4247 strain of F. oxysporum, whose maintenance was done in an inclined solid modified Sabouraud culture medium. In this work, a glycoprotein extract (GBP) obtained by hot extraction with phosphate buffer was fractionated with CETAVLON giving a fraction at pH 8.8 (Fraction B), characterized as a peptideoglalactomannan (PGM) because it contains glucose, mannose and galactose. PGM was used in phytopathogenic trials in Nicotiana tabacum cv. SR1 in order to detect the different types of defense responses present in the plant. The hypersensitivity response was evaluated in tobacco leaves through the production of phenolic compounds where, with the aid of UV light, it was detected that PGM induces a time and dose-dependent hypersensitivity response in tobacco leaves, although it does not cause necrosis in the leaves foliar tissue up to 72 h after treatment with the molecule. In tobacco plant roots, the systemic acquired response was evaluated by two parameters: the production of hydrogen peroxide (H2O2) and the expression of resistance genes (PR1 and PAL). H2O2 was microscopically detected by the deposition of 3,3-diaminobenzidine (DAB) in the root tissue. The expression of the resistance genes was analyzed by the real-time PCR technique (qRT-PCR), where RNA extracted from roots of F. oxysporum PGM-treated seedlings was used. PR1 showed a time dependent expression profile up to 72 h when treated with 400μg / ml PGM. This same gene showed a dose-dependent profile up to 72 h after PGM treatment. The PAL gene had its expression increased in function of time up to 72h after treatment with the two concentrations of PGM - 200 and 400μg / ml. These data suggest the phytopathogenic action of PGM of F. oxysporum and its possible use as an elicitor of defense responses in plants.	pt_BR
dc.description.sponsordocumentnumber	n/a	pt_BR
dc.description.abstractpt	Fusarium oxysporum é um fungo fitopatogênico muito estudado devido a sua capacidade de infectar safras de grande importância econômica, sendo descrito também como um patógeno emergente causador de doenças oportunistas em hospedeiros humanos imunocomprometidos. Sua parede celular é composta principalmente por polissacarídeos (80-90%) e glicoproteínas, muitas das quais possuem uma ampla ação imunológica, sendo capazes de induzir respostas imune/de defesa no hospedeiro infectado. O microrganismo utilizado foi a cepa 4247 de F. oxysporum cuja manutenção foi feita em meio de cultura Sabouraud modificado sólido inclinado. Nesse trabalho, um extrato glicoproteico (GBP) obtido por extração a quente com tampão fosfato foi fracionado com CETAVLON originando uma fração em pH 8.8 (Fração B), caracterizada como uma peptídeogalactomanana (PGM) por conter glicose, manose e galactose. A PGM foi utilizada em ensaios fitopatogênicos em Nicotiana tabacum cv. SR1 com o intuito de detectar diferentes tipos de resposta de defesa presentes na planta. A resposta de hipersensibilidade foi avaliada em folhas de tabaco através da produção de compostos fenólicos, onde, com auxilio de luz UV, foi detectado que a PGM induz uma resposta de hipersensibilidade tempo e dose dependente em folhas de tabaco, apesar de não causar necrose no tecido foliar, até 72h após o tratamento com a molécula. Em raízes de plântulas de tabaco foi avaliada a resposta adquirida sistêmica por dois parâmetros: a produção de peróxido de hidrogênio (H2O2) e a expressão de genes de resistência (PR1 e PAL). O H2O2 foi microscopicamente detectado pela deposição de 3,3 – diaminobenzidina (DAB) no tecido radicular. A expressão dos genes de resistência foi analisada pela técnica de PCR em tempo real (qRT-PCR), onde foi utilizado RNA extraído de raízes de plântulas tratadas com PGM de F. oxysporum. PR1 apresentou um perfil de expressão tempo dependente até 72h quando tratado com 400μg/ml de PGM. Esse mesmo gene apresentou um perfil dose dependente até 72h após tratamento com a PGM. O gene PAL teve sua expressão aumentada em função do tempo até 72h após o tratamento com as duas concentrações de PGM – 200 e 400μg/ml. Esses dados sugerem a ação fitopatogênica da PGM de F. oxysporum e sua possível utilização com um elicitor de respostas de defesa em plantas.	pt_BR
dc.subject.pt	Fusarium oxysporum	pt_BR
dc.subject.pt	PGM	pt_BR
dc.subject.pt	Resposta de Hipersensibilidade	pt_BR
dc.subject.pt	Resposta Adquirida Sistêmica	pt_BR
dc.subject.pt	PR1 e PAL	pt_BR