Avaliação do teste western blot para análise do líquido cefalorraquiano na mielopatia associada ao HTLV-1 / paraparesia espástica tropical

Ribeiro, Luiz Claudio Pereira

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Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS)
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Medicina
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MEDI - Dissertações de Mestrado
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dc.contributor.advisor	Sohler, Marzia Puccioni
dc.contributor.author	Ribeiro, Luiz Claudio Pereira
dc.date.accessioned	2018-08-17T16:47:55Z
dc.date.available	2018-08-17T16:47:55Z
dc.date.issued	2009-03-16
dc.identifier.citation	RIBEIRO, Luiz Claudio Pereira. Avaliação do teste western blot para análise do líquido cefalorraquiano na mielopatia associada ao HTLV-1 / paraparesia espástica tropical. 2009. 84 f. Dissertação (Mestrado) - Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro, Centro de Ciências Biológicas e da Saúde, Mestrado em Neurologia, 2009.	pt_BR
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/unirio/12252
dc.description.sponsorship	n/a	pt_BR
dc.language.iso	Portuguese	pt_BR
dc.rights	openAccess	pt_BR
dc.title	Avaliação do teste western blot para análise do líquido cefalorraquiano na mielopatia associada ao HTLV-1 / paraparesia espástica tropical	pt_BR
dc.title.alternative	Evaluation of the western blot test for liquid analysis cerebrospinal fluid in myelopathy associated with HTLV-1 / tropical spastic paraparesis	pt_BR
dc.type	masterThesis	pt_BR
dc.contributor.referee	Sohler, Marzia Puccioni
dc.contributor.referee	Almeida, Adilson José de
dc.contributor.referee	Vicente, Ana Carolina Paulo
dc.degree.department	CCBS	pt_BR
dc.degree.grantor	Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro - UNIRIO	pt_BR
dc.degree.level	Mestrado Acadêmico	pt_BR
dc.degree.local	Rio de Janeiro, RJ	pt_BR
dc.degree.program	Programa de Pós-Graduação em Neurologia	pt_BR
dc.subject.cnpq	CIÊNCIAS DA SAÚDE	pt_BR
dc.subject.cnpq	MEDICINA	pt_BR
dc.subject.cnpq	NEUROLOGIA	pt_BR
dc.subject.en	Cerebrospinal fluid	pt_BR
dc.subject.en	HAM/TSP	pt_BR
dc.subject.en	HTLV-1	pt_BR
dc.subject.en	intrathecal syntesis	pt_BR
dc.subject.en	western blot	pt_BR
dc.description.abstracten	Human T-lynphotropic virus type 1 (HTLV-1) is associated with adult T-cell leukemia (ATL) and with a chronic neurological disease, HTLV-1 – associated myelopathy or Tropical spastic paraparesis (HAM/TSP). In 1988, based on studies of Osame and colleagues, the World Health Organization established the clinical and laboratory criteria for the diagnosis of HAM/TSP. The laboratory diagnosis is based on detection of antibodies anti-HTLV-1 in serum and cerebrospinal fluid (CSF). It is important to demonstrate the synthesis of intrathecal antibodies anti-HTLV-1 while analyzing the CSF from individuals with HAM/TSP, since it represents a conclusive evidence of the immune response against HTLV-1 in the CNS. The objective of this study was to evaluate the test western blot previously adapted to demonstrate intrathecal synthesis of antibodies against the proteins of HTLV-1, as a support for the diagnosis of HAM/TSP. Paired CSF and serum samples (diluted to the same IgG concentration of the CSF) were selected from 14 HTLV-1 seropositive patients followed up at the outpatient Neuroinfection Unit of the Gaffrée & Guinle University Hospital (HUGG) diagnosed as having HAM/TSP. In addition, samples from 16 patients with other neurological diseases presenting negative serology for HTLV-1 were also analyzed. All were screened for the presence of HTLV-1 antibodies by ELISA and western blot in serum. The intrathecal synthesis of specific antibodies was evaluated by western blot (HTLV-BLOT 2.4). The presence of reactive bands more intense in CSF than in serum, or bands visualized only in the CSF was considered indicative of intrathecal synthesis of antibodies against HTLV-1 proteins. All 14 paired (serum and CSF) samples from patients with HAM/TSP presented evidence of intrathecal synthesis directed against at least one viral protein of HTLV-1. Concerning patients with other neurological diseases, no reactive bands were observed in the 16 paired samples studied. The test presented sensitivity, specificity, positive and negative predictive values of 100%. Intrathecal synthesis antibodies anti-HTLV-1 were mainly against the env (GD21 and RGP46-I) and gag (p24) proteins, by demonstrating specific bands in 93% (13/14) of the patients, when analyzed individually. Reproducibility was obtained by testing the samples of a patient with HAM/TSP in another Laboratory, with same results in the CSF. This was the first study in the medical literature which evaluated the WB in search for intrathecal synthesis of antibodies against HTLV-1 proteins in patients with HAM/TSP. Due to its high sensitivity and specificity, the test demonstrated to be a useful tool as a laboratory support in the diagnosis of HAM/TSP. Likewise the criteria of positivity by using WB in serum, the authors suggest the demonstration of intrathecal synthesis of antibodies against two viral proteins (env and gag) as for confirmatory laboratory diagnosis of HAM/TSP.	pt_BR
dc.degree.country	Brasil	pt_BR
dc.description.sponsordocumentnumber	n/a	pt_BR
dc.description.abstractpt	O vírus T-linfotrópico humano tipo 1 (HTLV-1) está associado a leucemia/linfoma de células T do adulto (ATL) e a uma doença neurológica crônica incapacitante, a mielopatia associada ao HTLV-1 ou paraparesia espástica tropical (HAM/TSP). Em 1988, com base nos estudos de Osame e colaboradores, a Organização Mundial de Saúde estabeleceu critérios clínicos e laboratoriais para o diagnóstico de HAM/TSP. O diagnóstico laboratorial baseia-se na detecção de anticorpos anti-HTLV-1 no soro e líquido cefalorraquiano (LCR). Na análise do LCR, é importante a demonstração da síntese intratecal de anticorpos anti-HTLV-1 em pacientes com HAM/TSP, pois representa evidência conclusiva da resposta imune contra o HTLV-1 no sistema nervoso central. O objetivo deste estudo foi avaliar o teste western blot (WB), previamente adaptado para demonstração da síntese intratecal de anticorpos contra as proteínas do HTLV-1, como apoio ao diagnóstico da HAM/TSP. Foram estudadas amostras pareadas de LCR e soro (diluído para mesma concentração de IgG do LCR) selecionadas de 14 pacientes atendidos no ambulatório de Neuroinfecção do Hospital Universitário Gaffrée e Guinle (HUGG) com diagnóstico de HAM/TSP, além de 16 pacientes com outras doenças neurológicas e sorologia negativa para HTLV- 1. Os pacientes foram triados por ELISA e confirmados pelo WB no soro. As amostras foram submetidas ao teste WB para HTLV-1 (HTLV-BLOT 2.4) e a presença de bandas reativas mais intensas no LCR do que no soro ou visualizadas unicamente no LCR foi considerada indicativa de síntese intratecal de anticorpos contra proteínas do HTLV-1. Todas as 14 amostras pareadas (soro e LCR) de pacientes com HAM/TSP apresentaram evidências de síntese intratecal dirigida contra pelo menos uma proteína do HTLV-1. Com relação aos pacientes com outras doenças neurológicas, não foram observadas bandas reagentes para HTLV-1 nas 16 amostras pareadas estudadas. O teste apresentou sensibilidade, especificidade, valores preditivos positivo e negativo de 100%. A síntese intratecal de anticorpos anti-HTLV-1 ocorreu principalmente contra as proteínas env (GD21 e rgp46-I) e gag (p24), por meio da demonstração de bandas específicas em 93% (13/14) dos pacientes, quando analisadas isoladamente. Foi observada a concordância entre os resultados obtidos da avaliação de um par de LCR e soro de paciente com HAM/TSP realizada em condições diferentes, sugerindo a reprodutibilidade do teste. Este foi o primeiro estudo da literatura médica que avaliou o teste WB para pesquisar a síntese intratecal de anticorpos contra proteínas do HTLV-1 em pacientes com HAM/TSP. Por apresentar elevadas sensibilidade e especificidade, o teste demonstrou ser um instrumento útil como apoio laboratorial ao diagnóstico da HAM/TSP. A exemplo do critério de positividade do teste WB no soro, os autores sugerem a demonstração de síntese intratecal de anticorpos contra duas proteínas virais (env e gag) como confirmatório para o diagnóstico laboratorial da HAM/TSP.	pt_BR
dc.subject.pt	Líquido cefalorraquiano	pt_BR
dc.subject.pt	HAM/TSP	pt_BR
dc.subject.pt	HTLV-1	pt_BR
dc.subject.pt	síntese intratecal	pt_BR
dc.subject.pt	western blot	pt_BR