Investigação molecular da síndrome de Prader-Willi em pacientes suspeitos

Rocha, Catielly Ferreira

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Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS)
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MEDI - Dissertações de Mestrado
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dc.contributor.advisor	Paiva, Carmen Lúcia Antão
dc.contributor.author	Rocha, Catielly Ferreira
dc.date.accessioned	2018-09-06T15:50:56Z
dc.date.available	2018-09-06T15:50:56Z
dc.date.issued	2011-05-25
dc.identifier.citation	ROCHA, Catielly Ferreira. Investigação molecular da síndrome de Prader-Willi em pacientes suspeitos. 2011. 70 f. Dissertação (Mestrado em Neurologia) - Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, 2011.	pt_BR
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/unirio/12434
dc.description.sponsorship	CAPES	pt_BR
dc.language.iso	Portuguese	pt_BR
dc.rights	openAccess	pt_BR
dc.title	Investigação molecular da síndrome de Prader-Willi em pacientes suspeitos	pt_BR
dc.title.alternative	Molecular investigation of Prader-Willi syndrome in suspected patients	pt_BR
dc.type	masterThesis	pt_BR
dc.contributor.referee	Paiva, Carmen Lúcia Antão
dc.contributor.referee	Martins, Rosa Rita
dc.contributor.referee	Nogueira, Eduardo Matos
dc.degree.department	CCBS	pt_BR
dc.degree.grantor	Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro - UNIRIO	pt_BR
dc.degree.level	Mestrado Acadêmico	pt_BR
dc.degree.local	Rio de Janeiro, RJ	pt_BR
dc.degree.program	Programa de Pós-Graduação em Neurologia	pt_BR
dc.subject.cnpq	CIÊNCIAS DA SAÚDE	pt_BR
dc.subject.cnpq	MEDICINA	pt_BR
dc.subject.cnpq	NEUROLOGIA	pt_BR
dc.subject.en	Prader-Willi Syndrome	pt_BR
dc.subject.en	Deletion	pt_BR
dc.subject.en	Methylation	pt_BR
dc.description.abstracten	Prader-Willi syndrome (PWS) usually shows obesity and mental disability due to lack of expression of genes located on the long arm of chromosome 15 (15q11-13) of paternal origin. Its clinical diagnosis is based on criteria proposed by Holm et al. (1993), which consist of the sum of points obtained from a list of common signs and symptoms of PWS. In 2001, these criteria were revised by Gunay-Aygun et al., and the signs and symptoms were classified according to the age group. These criteria point towards the patients who should undergo molecular testing. The aims of this work were to identify at molecular level the Prader-Willi syndrome through methylation test (Martínez et al., 2006) in 45 Brazilian patients with clinical suspicion of PWS; to verify whether the molecular diagnosis is compatible with the clinical diagnosis based on Holm and Gunay-Aygun’s criteria; and to investigate the presence of deletions in patients who were positive for methylation test. The molecular test of the exon-1 of Small Nucleolar Ribonucleoprotein Polypeptide N gene (SNRPN) used for detecting PWS employs a restriction enzyme (McrBC). The FISH technique was performed according to protocol Cytocell ®, which uses the probe Prader-Willi/Angelman the region, along with specific subtelomeric probe (15qter) for the control of the FISH technique. Out of 45 patients suspected, 13 had positive results of molecular analyse to PWS, so the technique detected 13 patients with PWS. Of these, one patient had been compatible only Holm, two Gunay based and eight on based both and two showed no signs and symptoms that filled the classification of Holm or Gunay’s criteria. Of the negative patients, three filled the Holm’s criteria, nine Gunay’s criteria, eight filled criteria both and twelve none of the criteria. The FISH technique detected eight patients with deletion 15q11-13. By means of clinical diagnosis by Holms et al.´s criteria led false positives and false negatives for PWS which could be detected by the test of methylation. Therefore, the analysis of the pattern of methylation of exon-1 SNRPN gene for the diagnosis of Prader-Willi syndrome is crucial for definitive diagnosis.	pt_BR
dc.degree.country	Brasil	pt_BR
dc.description.sponsordocumentnumber	n/a	pt_BR
dc.description.abstractpt	A Síndrome de Prader-Willi (SPW) cursa com obesidade e deficiência mental, devido à falta da expressão de genes localizados no braço longo do cromossomo 15 de origem paterna. O diagnóstico clínico da síndrome baseia-se em critérios propostos por Holm e colaboradores (1993), que consistem no somatório de pontos obtidos pela presença de sinais e/ou sintomas comuns na doença. Posteriormente, esses critérios foram revisados por Gunay-Aygun e colaboradores que propuseram novos critérios baseados em sinais e sintomas para cada faixa etária com a finalidade de apontar para a identificação de indivíduos que deveriam ser submetidos ao teste molecular. Os objetivos do trabalho são: 1) identificar em nível molecular a SPW, por meio do teste de metilação (Martínez et al., 2006) em 45 pacientes com o quadro clínico completo ou parcial da síndrome, 2) verificar se o diagnóstico molecular era compatível com o diagnóstico clínico baseado nos critérios de Holm e Gunay , e 3) investigar a presença de deleção nos pacientes com análise molecular positiva. O teste de metilação do éxon-1 do gene Small Nucleolar Ribonucleoprotein Polypeptide N (SNRPN), utiliza a enzima de restrição McrBC. A técnica de FISH foi realizada segundo o protocolo da Cytocell®, que utiliza a sonda da região Prader-Willi/Angelman, juntamente com a sonda subtelomérica específica (15qter) para o controle da técnica de FISH. Dos 45 pacientes suspeitos, 13 tiveram resultados positivos da investigação molecular para SPW, portanto a técnica detectou 13 pacientes com SPW. Destes, um paciente tinha sido classificado apenas segundo os critérios de Holm, dois segundo a proposta de Gunay e oito segundo ambos e dois não apresentaram sinais e sintomas que preenchessem os critérios de classificação de Holm ou Gunay. Com relação aos 32 pacientes negativos, três preenchiam os critérios de Holm, nove os de Gunay, oito preencheram ambos os critérios e doze nenhum dos critérios. A técnica de FISH detectou oito pacientes com deleção 15q11-13 dentre os 10 com resultado do teste de metilação positiva. Por meio do diagnóstico clínico por pontuação de Holm houve muitos pacientes falsos positivos e falsos negativos para a SPW, o que pôde ser detectado pelo teste de metilação. Portanto, a análise do padrão de metilação do éxon-1 do gene SNRPN para o diagnóstico da Síndrome de Prader-Willi é fundamental para o diagnóstico definitivo.	pt_BR
dc.subject.pt	Síndrome de Prader-Willi	pt_BR
dc.subject.pt	Deleção	pt_BR
dc.subject.pt	Metilação	pt_BR