Detecção, purificação parcial, caracterização e mutagenicidade de extrato de proteínas bioativas  de sementes de Sapindus saponaria L. (Sapindaceae)

Tavares, Gustavo Duarte Bocayuva

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dc.contributor.advisor	Aiub, Claudia Alessandra Fortes
dc.contributor.author	Tavares, Gustavo Duarte Bocayuva
dc.date.accessioned	2023-08-07T19:04:34Z
dc.date.available	2023-08-07T19:04:34Z
dc.date.issued	2019-02-21
dc.identifier.citation	TAVARES, Gustavo Duarte Bocayuva. Detecção, purificação parcial, caracterização e mutagenicidade de extrato de proteínas bioativas de sementes de Sapindus saponaria L. (Sapindaceae) . 2019. 63f. Dissertação (Mestrado em Ciências Biológicas) - Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro , Rio de Janeiro, 2019.	pt_BR
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/unirio/13816
dc.description.sponsorship	Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)	pt_BR
dc.language.iso	Portuguese	pt_BR
dc.rights	restrictedAccess	pt_BR
dc.title	Detecção, purificação parcial, caracterização e mutagenicidade de extrato de proteínas bioativas de sementes de Sapindus saponaria L. (Sapindaceae)	pt_BR
dc.title.alternative	Detection, partial purification, characterization and mutagenicity of bioactive proteins in Sapindus saponaria L. (Sapindaceae) seed extract	pt_BR
dc.type	masterThesis	pt_BR
dc.contributor.advisor-co	Siqueira Júnior, César Luis
dc.contributor.referee	Tavares, Gustavo Duarte Bocayuva
dc.contributor.referee	Costa, José Luiz Mazzei da
dc.contributor.referee	Salgueiro, Fabiano
dc.degree.department	CCBS	pt_BR
dc.degree.grantor	Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro - UNIRIO	pt_BR
dc.degree.level	Mestrado Acadêmico	pt_BR
dc.degree.local	Rio de Janeiro, RJ	pt_BR
dc.degree.program	Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas	pt_BR
dc.subject.cnpq	Ciências Biológicas	pt_BR
dc.subject.cnpq	Zoologia	pt_BR
dc.subject.en	Soapberry	pt_BR
dc.subject.en	Bioactive protein	pt_BR
dc.subject.en	Mutagenicity	pt_BR
dc.description.abstracten	Sapindus saponaria L., known as soapberry, is a plant native to the Neotropics, widely distributed in Brazil possessing several traditional uses, but still lacks studies that prove the involvement of proteins and their effects.In this sense, the present study sought to detect, partially purify and characterize, as well as to evaluate the mutagenic and cytotoxic response of the crude extract of proteins in soapberry seeds. Through extraction in aqueous medium, ammonium sulfate precipitation and gel filtration chromatography, were partially purified, an inhibitor of cysteine proteases and a serine protease. The inhibito, with molecular weight between 32 and 33 kDa, showed a high specific activity of inhibition of the papain, inhibiting 75% of its activity. The protease, of approximately 40kDa, presented greater proteolytic activity against specific substrate of serine proteases, as well as its activity inhibited specifically by serine protease inhibitor. In order to evaluate the mutagenic and cytotoxic potential of the crude seed extract, four different concentrations were evaluated by the Ames and Survival Test, using five different strains of Salmonella enterica sorovar Typhimurium, in order to evaluate different mechanisms of mutagenesis. Further, mutagenicity and cytotoxicity analyzes indicated that the crude extract at all concentrations tested do not induce mutagenic or cytotoxic responses to the strains used, in the absence of exogenous metabolism. Thus, the seeds of soapberry constitutively produce a cysteine protease inhibitor and a serine protease, indicanting that the detection of new bioactive molecules is a demonstration of the biotechnological potential of the plant to be studied.	pt_BR
dc.degree.country	Brasil	pt_BR
dc.description.sponsordocumentnumber	n/a	pt_BR
dc.description.abstractpt	Sapindus saponaria L., conhecida como saboeiro, é uma planta nativa dos Neotrópicos, com ampla distribuição no Brasil, possuindo diversos usos tradicionais, mas ainda carece de estudos que comprovem o envolvimento de proteínas e seus efeitos. Nesse sentido, o presente estudo buscou detectar, purificar parcialmente, caracterizar, e avaliar a mutagênicidade do extrato bruto de proteínas presentes nas sementes de saboeiro. Através da extração em meio aquoso, precipitação por sulfato de amônio e cromatografia por gel filtração, foram purificados parcialmente, um inibidor de proteases cisteínicas e uma protease serínica. O inibidor detectado, com peso molecular entre 32 e 33kDa, apresentou significativa atividade específica de inibição contra a papaína, inibindo 75% de sua atividade. Já a protease, de aproximadamente 40kDa, apresentou maior atividade proteolítica contra substrato específico para proteases serínicas, assim como teve sua atividade inibida somente por inibidor de protease serínica. A fim de avaliar o potencial mutagênico e citotóxico do extrato bruto das sementes, quatro concentrações diferentes foram avaliadas pelo ensaio de Sobrevivência e Teste de Ames, utilizando cinco cepas diferentes de Salmonella enterica sorovar Typhimurium, com a finalidade de avaliar diferentes mecanismos de mutagênese. Por sua vez, as análises de mutagenicidade e citotoxicidade indicaram que nenhuma das concentrações do extrato bruto testadas induzem respostas mutagênicas ou citotóxicas para as cepas utilizadas, na ausência de metabolização exógena. Dessa forma, as sementes de saboeiro produzem, de forma constitutiva, um inibidor de protease cisteínica e uma protease serínica, indicando que a detecção de novas moléculas bioativas é uma demonstração do potencial biotecnológico do vegetal a ser estudado.	pt_BR
dc.subject.pt	Saboeiro	pt_BR
dc.subject.pt	Proteínas bioativas	pt_BR
dc.subject.pt	Mutagênese	pt_BR