Análise do conteúdo de MIR159 em amostras de brotos comestíveis e microverdes de 6 espécies cultivadas

Oliveira, Maria Fernanda de

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Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS)
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Nutrição
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NUTR - Dissertações Mestrado
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dc.contributor.advisor	Fai, Ana Elizabeth Cavalcante
dc.contributor.author	Oliveira, Maria Fernanda de
dc.date.accessioned	2024-01-15T16:39:00Z
dc.date.available	2024-01-15T16:39:00Z
dc.date.issued	2023-10-31
dc.identifier.citation	OLIVEIRA, Maria Fernanda de. Análise do conteúdo de MIR159 em amostras de brotos comestíveis e microverdes de 6 espécies cultivadas. 2023. 41 f. Dissertação (Mestrado em Alimentos e Nutrição) - Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, 2023.	pt_BR
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/unirio/13967
dc.description.sponsorship	n/a	pt_BR
dc.language.iso	Portuguese	pt_BR
dc.rights	restrictedAccess	pt_BR
dc.title	Análise do conteúdo de MIR159 em amostras de brotos comestíveis e microverdes de 6 espécies cultivadas	pt_BR
dc.type	masterThesis	pt_BR
dc.contributor.advisor-co	Reis, Marta Citelli dos
dc.contributor.referee	Fai, Ana Elizabeth Cavalcante
dc.contributor.referee	Reis, Marta Citelli dos
dc.contributor.referee	Silva, Otniel Freitas
dc.contributor.referee	Miyahira, Roberta Fontanive
dc.degree.department	CCBS	pt_BR
dc.degree.grantor	Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro - UNIRIO	pt_BR
dc.degree.level	Mestrado Acadêmico	pt_BR
dc.degree.local	Rio de Janeiro, RJ	pt_BR
dc.degree.program	Programa de Pós-Graduação em Alimentos e Nutrição	pt_BR
dc.subject.cnpq	Ciências da Nutrição	pt_BR
dc.subject.en	Nutrition	pt_BR
dc.subject.en	Plant-based foods	pt_BR
dc.subject.en	Sprouted foods	pt_BR
dc.subject.en	Transfer between kingdoms	pt_BR
dc.subject.en	Plant mir	pt_BR
dc.description.abstracten	The theory of cross-regulation between kingdoms, in the context of food and nutrition, can be described as the potential transmission of bioactive genetic material between foods of plant origin and mammals. MicroRNAs (miR) are molecules highlighted as possible executors of this phenomenon. Research aimed at developing and validating analytical methods for detecting these miRs and contributing to a better understanding of the theory of cross-regulation between kingdoms and species could shed light on the possibility of miRs actually acting as effector molecules of dietary origin, configuring them as another potential bioactive compound in food. This study worked on the hypothesis that foods from the edible sprouts and microgreens class, as they are plants in the primary stage of development and therefore have accelerated protein synthesis, should undergo modulation of miR synthesis, especially miR159, which acts together with the plant hormone abscisic acid (ABA), responsible for seed dormancy. Furthermore, there is evidence of antitumor potential exerted by miR159 in human cells. Therefore, this study aimed to analyze the expression of miR159 over 14 days after germination in samples of 6 vegetables consumed in the form of edible sprouts and microgreens; and determine which has the highest content. The species selected for this study were mustard (Brassica juncea), broccoli (Brassica oleacea var. italica), red cabbage (Brassica oleacea var. capitata), watercress (Nasturtium officinale), chia (Salvia hispanica) and beet (Beta vulgaris). The species were grown in a substrate of perlite and vermiculite in a ratio of 1:1 or, in the case of chia, on filter paper. The germination process took place at room temperature (20-25°C), with a relative humidity of ~70% and an illumination interval of 12 hours in the dark and 12 hours under LED light. The samples were sprayed with distilled water twice a day (morning and evening) in sufficient quantity to maintain constant humidity. Germination took place over 14 days. Red cabbage was grown for a longer period (90 days). The TRIzol™reagent was used for RNA extraction and after treating the samples with TURBO™DNase (Life Technologies), quantification was carried out in a BioDrop μLITE spectrophotometer by analyzing the absorbance at 260nm. Quantification of miRNA 159 was realized using the Applied Biosystems 7500 real-time PCR system and the TaqMan MicroRNA Assay kit (Life Technologies) after reverse transcription had been carried out using the TaqMan microRNA kit (Life Technologies). The results of the real-time PCR tests showed that the watercress samples had the highest relative expression of miR159 on any of the assayed days and the mustard samples the lowest. In general, it was also possible to identify a downward trend in the relative expression of miR159 in the samples over the period, which was even lower in the adult plant sample. The beet microgreen samples, on the other hand, were the only ones to show an increase in miR159 expression when compared to the shoots. It can be concluded that there is modulation in the relative miR159 content of the vegetables analyzed at the sprout and micro-green stages, with the 7-day-old watercress samples showing the highest relative expression. These data indicate that, for future research into dietary miR159, sprouts and microgreens may be samples of interest because they showed modulation throughout their development.	pt_BR
dc.degree.country	Brasil, RJ	pt_BR
dc.description.sponsordocumentnumber	n/a	pt_BR
dc.description.abstractpt	A teoria de regulação cruzada entre reinos, no âmbito de alimentos e nutrição, pode ser descrita como a potencial transmissão de material genético bioativo entre alimentos de origem vegetal e mamíferos. MicroRNAs (miR) são moléculas destacadas como possíveis executoras deste fenômeno. Pesquisas que visem o desenvolvimento e validação de métodos analíticos, para a detecção destes miRs e que corroborem para um melhor entendimento da teoria de regulação cruzada entre reinos e espécies pode trazer à luz a possibilidade de miRs atuarem de fato como moléculas efetoras de origem dietética, configurando como mais um potencial composto bioativo de alimentos. O presente estudo trabalhou com a hipótese de que os alimentos da classe de brotos comestíveis e microverdes, por serem plantas em estágio primário de desenvolvimento, logo, com síntese acelerada de proteínas, devem sofrer modulação da síntese de miR, principalmente o miR159, que atua junto ao hormônio vegetal ácido abscísico (ABA), responsável pela dormência de sementes. Além disso, há evidências de potencial antitumoral exercido pelo miR159 em células humanas. Nesse sentido, este estudo teve como objetivos: analisar a expressão do miR159 ao longo de 14 dias após a germinação em amostras de 6 vegetais consumidos na forma de brotos comestíveis e microverdes; e determinar qual amostra apresenta o maior conteúdo. As espécies selecionadas para esse estudo foram: mostarda (Brassica juncea), brócolis (Brassica oleacea var. italica), repolho roxo (Brassica oleacea var. capitata), agrião (Nasturtium officinale), chia (Salvia hispanica) e beterraba (Beta vulgaris). As espécies foram cultivadas com o substrato perlita e vermiculita, na proporção de 1:1 ou, no caso da chia, sobre papel de filtro. O processo de germinação ocorreu à temperatura ambiente (20-25°C), com uma umidade relativa de ~70% e um intervalo de iluminação de 12 horas no escuro e 12 horas sob luz LED. As amostras foram pulverizadas com água destilada duas vezes por dia (de manhã e à noite) em quantidade suficiente para manter a umidade constante. O processo de germinação foi efetuado durante 14 dias. O repolho roxo foi cultivado durante um período mais longo (90 dias). O reagente TRIzol™ foi utilizado para extração do RNA e após o tratamento das amostras com DNase, a quantificação foi realizada em espetrofotômetro BioDrop μLITE através da análise da absorbância a 260nm. A quantificação do miR159 foi realizada utilizando o sistema de PCR em tempo real Applied Biosystems 7500 e o kit TaqMan MicroRNA Assay (Life Technologies) após a transcrição reversa ter sido efetuada utilizando o kit TaqMan microRNA (Life Technologies). Os resultados dos testes de PCR em tempo real demonstraram que as amostras de agrião apresentaram a maior expressão relativa de miR159 em quaisquer dos dias analisados, e as de mostarda a menor. De uma maneira geral, ainda foi possível identificar uma tendência de diminuição da expressão relativa de miR159 nas amostras ao longo do período, que foi ainda menor na amostra de planta adulta. As amostras de microverde de beterraba, por sua vez, foram as únicas que apresentaram aumento da expressão de miR159 quando comparadas aos brotos. Conclui-se que existe modulação de conteúdo relativo de miR159 dos vegetais analisados nas fases de broto e microverde, sendo as amostras de agrião de 7 dias as que apresentaram a maior expressão relativa. Estes dados indicam que, para investigações futuras sobre miR159, os brotos e microverdes podem ser amostras de interesse por apresentarem modulação ao longo de seu desenvolvimento.	pt_BR
dc.subject.pt	Nutrição	pt_BR
dc.subject.pt	Alimentos plant-based	pt_BR
dc.subject.pt	Alimentos germinados	pt_BR
dc.subject.pt	Transferência entre reinos	pt_BR
dc.subject.pt	Mir vegetais	pt_BR